现代中药的化学研究方法

　　2　复方新成分

　　中药复方煎煮过程中的新成分产生问题。对于单味中药来说，其中的有效成分可能是以结合的形式存在的，如：丹参中的丹酚酸B具有两个羧基，是以不同的盐的形式存在的（K+，Ca2+，Na+，NH4+等复合形式），在煎煮、浓缩过程中，少部分水解生成紫草酸和丹参素，一部分丹参素在酸性条件下变为迷迭香酸；丹酚酸A，C在溶液中可以互变等。这些成分间的互变，不是新成分的产生。又如：生脉饮中的5-羟甲基糠醛的问题，它不是在煎煮过程中产生的新成分，而是五味子中的固有成分，至于复方煎煮中，该成分增多的问题，纯属化学成分间的助溶现象。哪些成分在中药或复方中属于新成分的产生呢？典型的例子为乌头在经过炮制后，其中的乌头碱几乎全部变为乌头次碱和乌头原碱（发生的酯水解反应），应为新成分的产生。这里所指的新成分不一定是新化合物，而是指产生了较多的次生产物。中药复方配伍改变了单味药材固有的特性（如pH环境），有些成分将发生络合、重排、水解、降解等反应，成分间可能发生复合、加成、插入、缩合等反应，而产生的成分，应称为煎煮过程产生的新成分。

　　新成分在复方中的地位一直未得到足够重视，像乌头碱水解产物，决定着炙乌头的药效和毒性，这样我们必须去考虑它们的存在。像三黄片中的小檗碱和黄芩甙的复合物，应称为中药复方的新成分，由于它在水中的溶解度较低，往往放置后会出现沉淀，可能古人在临床中发现了这个问题，在用时讲究以沸水浸泡，趁热服用。

　　又如，干姜和生姜的主要区别是：生姜中的姜辣素（gingerol）类成分含量高，由于此类化合物在结构中均具有β-羟基酮的片段，在干燥过程或加热过程中，易于脱水变为α，β-不饱和酮结构的姜酚类(shoagol，干姜的主要成分)，可以推测古人用生姜时往往是压生姜汁服用的做法是有道理的。综上，新成分在复方中药的产生是必然的，但对于新成分也不能一概而论，新成分必须达到它的药效，能控制复方的总体药效时才有意义，才不能被忽视。

　　复方新成分的一般确定方法，常规是用各单味药材在相同条件下分煎液合并，利用DAD-HPLC或各种展开条件下的TLC，与合煎液的比较，如果发现有新的、大量的成分出现时，就可以对该成分进行系统的定向分离、纯化，以得到该化合物，进而利用光谱技术等，确定它的化学结构。

　　3　复方有效部位

　　中药复方有效部位制备的方法（Ⅱ类新药），一般要先对复方的有效部位进行系统的药效筛选，筛选时，可以按极性段进行分段，也可以按不同类别的成分群进行分段，也可以两者结合的方法。在多指标药效筛选的基础上，决定各部位的取舍，以组成新的“处方”，该“处方”中应明确各类成分的比例和最低含量或含量范围。在证明单煎液合并与合煎液的药效等价后，也可以分别制备各药材的有效部位，并制成针对该复方作用方向的标准提取物，根据药材在处方中的比重以及相应标准提取物的收率，决定新“处方”中各药材有效部位的重量（中间体标准提取物相加法），进而开展制剂的研究。这样的方法，对于有效成分可知率的要求亦相对易于达到，可以使质量不稳定的原药材或饮片，变为质量相对可控稳定的标准提取物浸膏粉，中间体相对可控后，也就保证了产品质量的可控性。

　　4　复方指纹图谱

　　指纹图谱目前包括光谱指纹图谱（如IR，UV等）和色谱指纹图谱（如TLC，2D-TLC，GC，HPLC，DAD-HPLC等）。在应用指纹图谱前，要明确这些指纹图谱的性质（由哪些成分组成，这些成分是否为有效成分或与临床疗效具有相关性，或是否为有毒成分需要限量控制，成分间比例的变化是否影响成品的疗效或作用方向等等）。建立指纹图谱要在原药材有种植基地的基础上开展，否则将无法进行和开展。