具体步骤为:先分离出蜜环菌纯菌种,扩大培养,再在培养瓶内放入培养基,接种蜜环菌,生长以后加入沙质土,种上种麻,盖上本土,用棉塞封口,调控室内温度,温度一般为15—22℃,最适宜生长的是18—22℃,瓶内到26℃时就易腐烂。可培养出白麻和少量的箭麻。
为促进蜜环菌生长,提高
天麻产量,在培养菌枝和菌材时或栽种天麻过程中,可加半腐的青冈等阔叶树落叶,添加适量锯木屑,施用过磷酸钙粉(每窖20—30克)或喷洒10%一15%马铃薯或1%一2%葡萄糖水。在天麻生长期中,可施用0.2%一0.3%的磷酸二氢钾或过磷酸钙粉肥。
天麻的有性繁殖及新法栽培
中国农业科学院特产研究所现代生物技术研究室为解决天麻块茎及密环菌退化问题,开展了有性繁殖和密环菌纯化试验,筛选井纯化出天麻种子萌发必须的萌发菌,提高了种子的萌发率,使人为控制天麻有性繁殖成为可能。利用有性繁殖第一、二代种麻及纯化的密环菌栽培生产天麻,可年产鲜天麻15-30kg/平方米。同时,利用集约化袋栽天麻技术,立体生产,产量是传统大田坑栽的15-30倍。
1 有性繁殖
1.1人工授粉及播种选择发育完好、无破损、100 g以上的箭麻作为种栽,室内栽植为11月至次年4月上旬;室外在4月上旬至5月上旬,生产上一般采用春栽。在抽薹前搭荫棚,防止强光直接照射损伤花薹。同时每支花薹一侧插支小木柱,以防倒伏。天麻开花当天进行人工授粉,每天8-9时,将着生在花蕊柱顶端的药帽轻轻挑出,再将药帽内的花粉块挑起,轻放另一朵花内,在已分泌出淡黄色胶质粘液的雌蕊柱头上进行异花授粉。授粉后2-3周左右,种子即可成熟,将果实尚未开裂的成熟种子采收,立即播种。
播种时,先准备好播种床或木箱,箱底放1层菌材,在菌材上铺1 层柞树叶(或阔树叶)。将天麻种子与已培养好的萌发菌二级菌种充分拌均混合,撒放在柞树叶上,或将种子撒在带有萌发菌的柞树叶(先将萌发菌与柞树叶共同培养,使柞树叶上长满萌发菌)上,再覆盖1 层柞树叶,摆放1层菌材,最后用填充料封好,上下两层菌材间可摆撒3-4层。温度及水分管理同常规天麻栽培方法。
1. 2 有性繁殖种栽的培养 播后的种子在萌发菌的作用下,需30-40天时间长成原球茎,继后原球茎上长出细长的营养繁殖茎。原球茎与营养繁殖茎被密环菌侵入后继续发育,经一夏天的培养长成米麻。经冬眠后,米麻顶芽和靠近顶芽的腋芽萌发发育成新的块茎,其中少数新块茎较大,形成箭麻,多数米麻顶芽发育成大小不等的白麻,即为生长势强、繁殖系数高的优良天麻种栽。
2密环菌的分离纯化及培养
利用纯化的密环菌培养菌材,不仅可以提高菌材的质量,还可以缩短培养时间,最终达到提高天麻的产量、质量的目的。
2.1培养基的制备 取去皮马铃薯200g,琼脂(洋菜)20g,葡萄糖20g。将马铃薯切成片,放在锅内加1000ml水煮沸约半小时后,过4层沙布,将琼脂切碎加入滤液中加热,使之溶化后再加入葡萄糖,搅拌均匀,趁热分装于三角瓶或试管中,每管装入5-10ml,经1.2磅高压灭菌30分钟,取出按一定斜度摆好,冷却后即成马铃薯斜面固体培养基,放在0-4℃冰箱保存备用。
2.2一级菌种的分离接种 采取新鲜菌索或子实体,利用0.1 %的升汞液表面消毒30-60秒,再用无菌水冲洗2-3次,在接种箱中(无菌条件下)将其切成1cm长菌索,或取子实体内组织块接入试管斜面培养基(或三角瓶培养基)上,放于25℃的恒温箱内培养,经1 周左右即有棕红色菌索出现,再经转接即可培养出数量较大的一级菌种,放在低温条件下保存备用。
2.3二级菌种的培养 二级菌种的培养基可采用以下配方:(1)取玉米轴粉35%、锯未35%、麦麸30%,葡萄糖少量(17-20g/kg)。(2)阔叶树锯未70%,麦麸30%。将上述材料充分混合,用水或马铃薯水调湿到50%-60%。PH调至5.5-6.0,然后装瓶,培养料装至瓶肩部,然后在瓶的中央扎直径1cm的孔,深约达培养料的50%。瓶口用牛皮纸封好,高压灭菌1 小时取出冷却后,将一级菌种在无菌条件下接入固体培养基小孔内,放在25℃的恒温箱或控温室内培养,经1个月左右菌丝体全部充满培养基,并有大量棕红色菌索出现,即成二级固体菌种,可放在低温避光处保存或用于培养菌材。利用二级菌种培养的菌材,蜜环菌生长势强,接菌均匀,菌索生长繁茂,培养的菌材质量好,天麻产量高。
3集约化栽培
3.1广口瓶栽培 瓶栽天麻,将瓶摆在床架上,只需控制室内温度即可。有效利用空间面积,操作简易。广口瓶高18cm,直径8cm,瓶口内径4cm。经试验,每瓶下种2-3个米麻,平均产大小天麻块茎38.6个,鲜重97.9g,最大的单个重达46g。如果每平方米放100 瓶,5层床架放500 瓶,每瓶按最低产60g 计算,则可年产鲜麻30kg/平方米。
栽培方法 将培养料装至瓶容积的1/3 ,高压灭菌,冷却后接入二级蜜环菌菌种,置于12-22℃温室内培养30天,即成为蜜环菌的培养基。在每瓶培养好的蜜环菌培养基上,放3cm 二厚的基础培养料(最好用腐殖上加少量细沙和小木块或用杂木屑、半腐熟落叶加沙及小木块,含水量50%-55%),再放入1-3个米麻,等距离植入培养料内,顶芽向外,然后再装入培养料至瓶肩,塞棉塞进行培养,培养期需8-12个月。
管理 在整个生长发育过程中,一般不需要往瓶内浇水,培养料的湿度保持在60%,室温保持在20-25℃。如果温度超过27℃、湿度超过70%,易出现烂麻现象;低于10℃,天麻生长受阻,进人体眠状态;培养料湿度在30%时,天麻生长不良。瓶栽虽能提高产量,但生长受限制,箭麻很少,多是中小型块茎,只能作种。
3.2塑料袋栽培 用塑料袋栽培天麻比瓶栽的优点更多,便于管理,成本更低,一般在10-11月进行栽种,袋栽法如下:
袋内装菌棒 用长45cm、宽28cm的聚乙烯塑料袋,经0.2%的高锰酸钾或来苏儿水溶液消毒塑料袋,底层装入少量湿度为35%的基础培养料(最好用腐殖土)和小木块,然后垂直放入2根直径5-7cm、长20cm的优质菌棒。一边注袋内抓腐殖土,一边向菌棒周围放米麻,米麻的播种量为25g,全部放在培养料内,装培养料的高度为20cm。袋口塞棉塞,用绳轻轻将口扎上,把塑料袋放在床架上培养管理。栽麻时的湿度为30%-35%。到天麻生长期,料内水分增至65%。袋内温度控制在20-25℃,一直到秋后起麻时都不得超过25℃。天麻生长后期,可将袋周围扎若干个小孔,以利通风脱水,防止烂麻。室内要常消毒灭菌和防鼠害。