免疫损伤

    图6  阳性贮脂细胞胞质呈棕黄色S-MA免疫组化染色400×

    凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ是由肝细胞合成的维生素K依赖性凝血因子。肝纤维化（硬化）时，在肝损伤尚未引起循环衰竭的情况下，大鼠PT延长，临床表现为出血倾向。由于：①肝细胞损害时，蛋白质合成功能低下，维生素K吸收障碍，使维生素K依赖性凝血因子的前体不能转化为有活性的凝血因子。导致凝血障碍。②肝病变时，由于肝细胞功能紊乱，合成肝素酶的功能降低，使肝脏对肝素或肝素类物质的灭活能力下降，血浆中肝素浓度增加，抗凝活性增强。③肝功能障碍引起凝血因子合成减少，最先影响FⅦ，其次是FⅡ，最后是FⅤ和FⅩ。相对于内源性凝血途径和其他因子而言，FⅦ的生物半寿期最短（6～8h），因此在反映肝源性凝血障碍和功能恢复的检测指标中，PT较为敏感。本研究高剂量治疗组PT较正常对照组略低，但该差异无临床意义（<3s）。

    1.3  中药组方：黄芪、蜈蚣、三七、山慈姑、郁金、枳实、白术。采用现代中药制剂工艺，通过质量监测、稳定性实验、卫生学检查等环节制成标准颗粒剂备用。临时按剂量要求配成水溶液即可服用。

    1.4  肝纤维化大鼠的药物治疗  分别给低剂量、高剂量治疗组以制备好的中药颗粒溶液灌胃，剂量分别为1g/1ml/100g体重、2g/1ml/100g体重；1次/d，共4周。

    本研究在给模型组采血时发现，即使采血很顺利，血液和抗凝剂及时彻底的混合，仍有2只大鼠采血后立即发生了凝血，可见少部分肝纤维化的大鼠已处于高凝状态。血浆凝血酶原时间延长固然与FⅦ合成不足有关，但也不排除由于凝血因子的提前过度消耗而引起继发性凝血障碍。

    1.1.1  日立7150自动生化分析仪及相关试剂，测定血清ALT及A、G（A/G）。

    吞噬细胞和储脂细胞模型组显著高于正常对照组（表4），治疗后略有降低，高剂量组较低剂量组降低明显（图5、6）。表3  肝间质胶原纤维密度（Mallory染色）（面密度/μm2，x±s）注：*与正常组比较有显著性差异P<0.    05; Δ与模型组比较有显著性差异P<0.    05    表4  储脂细胞和巨噬细胞计数（个/视野）（免疫组化染色）（±s)

    3.4  中药复方针对肝纤维化的病机特点（本虚标实），据治肝补脾原则组方，达益气健脾、理血软肝之功效。其作用机理为：①有效地保护肝细胞，减轻肝细胞变性坏死的程度。如：黄芪、白术可保护肝细胞，促进肝糖原合成；郁金（姜黄素）对肝细胞损害有抑制作用；山慈姑（秋水仙碱）有促进肝细胞再生，减少肝小叶变性坏死的作用。②有效地调节免疫功能。其中黄芪（黄芪多糖）、白术能增强机体免疫活性，对细胞免疫、体液免疫和非特异免疫均有调理作用。③有促凝和抗凝活性，控制出血、凝血倾向。三七有明显的护肝作用，使肝细胞合成凝血因子和灭活肝素类物质的能力不至严重减低，纠正凝血时间和凝血酶原时间；白术有抗凝血作用，枳实可增加冠脉流量，减少血管阻力，改善肝脏微循环。④抑制胶原纤维增生，预防和延缓肝硬变的发生。山慈姑的主要成分为秋水仙碱，能抑制肝内储脂细胞(结蛋白阳性细胞)的增殖和转化，减少胶原合成及在肝窦周沉积［6］，从而减轻肝脾肿大，延缓肝硬变的发生。蜈蚣能解毒软坚，组织切片观察结果也证实了这一作用。因此，中药复方在保护肝脏（恢复肝功能）、改善肝脏微循环、抗肝纤维化和改善出血倾向等方面起到明显疗效，是临床有待开发应用的良方。

    2  结果