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青光眼是以视盘呈典型凹陷及视网膜神经节细胞死亡为特征的眼病。目前青光眼的治疗局限于降低眼压,尚缺乏有效的保护視網膜神經細胞(RN)的药物。灯盏花主要含有以野黄芩苷为主的黄酮、香豆素、酚酸类等化合物,具有散寒解表,活血舒筋,止痛消积等功效,临床广泛用于治疗高血压、心律失常及心绞痛。随着对其药理研究的深入,灯盏花的应用范围正在拓展,青光眼的治疗就是一例。但其保护RN的具体成分尚不明确。
和层黏连蛋白(LN)包被的96孔板中;于培养3天后,分别加入等渗磷酸盐缓冲液及不同含量的咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷溶液继续培养两天,采用四唑盐比色法测量其存活细胞的吸收值,同时对部分细胞行Nissei体染色检查。
Nissei体染色检查结果表明,培养5天的存活细胞大部分为神经细胞,与空白对照组比较,咖啡酸含量在3.9~1000微克/毫升、东莨菪内酯、野黄芩苷含量在250~1000微克/毫升时,神经细胞的吸收值均明显增加。
本研究以灯盏花中的咖啡酸、东莨菪内酯、野黄芩苷为对象,观察它们对体外培养的視網膜神經細胞存活的影响。具体做法是:采用胰酶消化法将18只出生2~3天的乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)