基因胰岛素

　　随着科学技术的发展，现在科学家已经改为用酵母菌、昆虫培养细胞、或哺乳动物培养细胞等真核细胞作为表达载体，而少用大肠杆菌。

　　用大肠杆菌产基因胰岛素或干扰素是老的方法，缺点多。

　　[/tr]

　　大肠杆菌生产干扰素不能分泌出来，且没有生物活性，那怎么办呢？

　　目前我国生产干扰素的主要是大肠杆菌

　　哪些细胞能产生干扰素？

　　外，用大肠杆菌表达，由于缺乏翻译后的加工过程如糖基化等等，故而用其制备的干扰素，难以具备天然干扰素所具备的生活学活性。即便用枯草杆菌和酵母菌做受体也不能改变这种缺陷。由于这些原因，人们都把希望寄托在千扰素的真核研究中。

　　y -IFN 的原核表达一般在大肠杆菌中进行。其基本策略是将基因胰岛素放入pMAL-c或BV220载体，再转染大肠杆菌DH$。进行表达。Song和Lillehoj、刘红梅等都做了原核表达的尝试。但是这种原核表达的产物却很难应用于生产，这是因为大肠杆菌做受体细胞并不能将干扰素分泌到体外，必须将菌体破碎，因而提纯非常困难，而且所谓提纯的产物中往往也含有毒素之类的有害因子。此

　　[/tr][tr]3.2.2 chIFN-y的原核表达

　　[td]V567V 于 2007-05-14 09:47 在大作中提到：[/td]

　　[tr]

　　胰岛素基因能在细菌中表达吗？没有了高尔基体等细胞器了。

　　1978年美国的2个实验室合作，通过基因工程使E.coli合成了人胰岛素。在实验室中将人胰岛素基因A、B链的人工合成基因分别组合到E.coli的不同质粒上，然后再移至菌体内，着种重组质粒在E.coli细胞内进行正常的复制和表达，从而使带有A、B链基因的工程菌株分别产生人胰岛素A、B链，然后再用人工的方法，在体外通过二硫键使这2条链连接成有活性的人胰岛素。