血友病基因治疗模型中产生的IX和VIII因子达到治疗水平

    摘要：在美国国家血友病基金会基因治疗研讨会上研究人员报道：基因治疗已能成功地治疗动物模型的A型血友病和B型血友病。（美国国家血友病基金会基因治疗研讨会报道）

    在华盛顿特区召开的国立血友病基金会基因治疗会议上，北卡罗来纳大学和北卡罗来纳州杜克（ Duke） 医学院的Christopher Walsh及其同事以“血友病的基因治疗”为标题报道了他们的研究成果。

    他们说：若能保证人IX因子(hFIX)和人VIII因子(hFVIII)持续稳定在治疗水平，将使血友病的治疗发生重大的变革。他们报道了对A型及B型血友病的基因治疗方法。他们采用重组腺相关病毒(rAAV)对hFIX和hFVIII基因进行转移。

    研究人员选用rAAV是因为它是一种单链的DNA病毒，能够使其增殖达到高浓度水平（>亿万个颗粒/毫升）。而且它也特别适合用于己于血友病的基因治疗，因为它是非致病性的，对于人类和动物都具着高安全性。rAAV还能感染较多的组织，包括骨骼肌和肝脏。这两种组织都是血友病基因治疗可选择的目标。

    Walsh等说：“我们以前曾证明rAAV携带狗FIX(cFIX)基因在患B型血友病的狗中能产生达到治疗水平的cFIX。一次肌肉注射病毒就能使cFIX蛋白稳定持续地产生。而且FIX的表达一直持续至今，2年内没有变化。”

    研究人员现正在研究改善FIX表达几种方法。他们还开发了能产生功能性hFVIII的几种rAAV载体。FVIII转移基因含4500个碱基对，而rAAV的包装限制为4675个碱基对，所以研究人员为肝特异性的转移基因表达采用了小的调控元件。

    他们在几个不同的鼠模型其中包括FVIII基因敲除的小鼠中，测试了这种rAAV/FVIII载体。小鼠通过门静脉接受1-2x1011载体颗粒。在病毒注射4周后，血浆hFVIII水平逐渐增加到约55ng/ml（为正常hFVIII水平的27%）。在小鼠体内这一血浆水平已持续了6个月。逆转录酶多聚酶链反应显示hFVIII mRNA表达是肝特异性的。

    Walsh等总结道：“新载体合并了重新设计的表达试剂盒，同缺乏肝特异性的调控元件的载体相比，能产生多10倍的mRNA和多5-10倍的蛋白。小鼠中这些新载体的测试还在进行中。我们的结果证明rAAV基因转移是一种有希望的血友病治疗方法。”