细菌L型培养的开展与改进,使感染病例培养阳性率明显提高。因此,医院感染科应广泛开展细菌L型培养以提高细菌L型感染的诊断与治疗。
细菌L型为细胞壁缺损的变异菌,抗生素广泛应用是诱导细菌L型形成的重要因素。医院感染开始可为普通细菌感染,经抗生素治疗后形成L型,也可开始即为L型感染,造成细菌L型医院感染的因素有:机体抵抗力降低;大量应用广谱抗生素;感染性疾病没有及时治疗;慢性迁延性疾病。引起医院感染的细菌L型抗药性强,治疗困难,根据药物敏感试验结果,合理应用抗生素,同时应用免疫抑制剂及输血或血浆,加强支持疗法。
结核菌l型由于抗生素的广泛应用等因素,使细菌L型感染增多,细菌L型感染机会的广泛存在,以往由于细菌L型培养未能广泛开展而未被发现。引起感染的L型病原菌以金黄色葡萄球菌为多,其次为化脓性链球菌、表皮葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、枸橼酸杆菌等。L型引起的医院感染多发生于慢性疾病、体质虚弱的患者。患者在非感染性疾病或原发病的基础上继发新的感染,病情较重。尤其金黄色葡萄球 菌与鼠伤寒沙门氏菌感染往往病情危重。
中耳炎患者分泌物细菌培养大多阴性,培养不出细菌,但该病有强烈的感染指征[20]。Ataoglu采用心脑肉汤和特殊的高渗硫乙醇酸钠肉汤对40例中耳炎患者分泌物进行培养,其中6例在硫乙醇酸钠法有L型细菌生长,而常规培养无细菌生长,因此他认为:经久不愈的慢性中耳炎与细菌L型感染有重要的关系。
结核菌l型发现结核的复发与分枝结核杆菌的L型感染有关。他对2412例结核病例进行了研究,发现214例患者分离出了结核菌L型。进一步研究显示:细菌L型引起的结核病容易复发,表明分离出不稳定的L型是一个重要的预测信号,显示了结核病复发的高度危险性,Glanov调查表明:伴有细菌L型的结核患者症状较重,易于进展,且预后不良。慢性结核病灶内,结核菌以L型为主,且形态多样,有圆球体、巨形体和长丝体等,其形态明显不同于结核菌。由于结核菌L型细胞壁中的抗原成分丢失或减少,其致病性相对减弱,常缺乏明显的临床症状和体征,造成临床误诊。结核菌L型也是结核菌抵抗外界环境和赖以生存的重要形式,细菌L型可在体内长期存活,生长、繁殖,导致结核病缓慢地进展,L型细菌又可大量繁殖,引起L型败血症或回复为结核菌,导致结核病恶化进展。结核菌L型也是重要的传染源之一,故应高度重视结核菌L型的检出。
稳定的细菌L型可长期潜伏在机体内,使机体产生特异性抗体,使患者形成慢性病灶,反复发作,如肾炎、风湿性关节炎等。细菌L型能通过胎盘垂直感染胎儿,细菌L型的原生质体同中等大小的病毒相似。细菌L型的致病性,不仅返祖后具存,某些L型细菌本身也能致病。L型细菌可能是某些传染病(如鼠疫、结核病和霍乱等)病原体的一种保存形式,在临床活动中该菌也是一类值得注意的耐药性微生物。
结核菌l型临床病例中分离到的细菌型和L型对药物敏感性不同,因此在临床治疗时应同时考虑二者的药物敏感情况,采取联合用药方案,主张应根据所分离到的细菌及L型的药物敏感试验结果来决定用药,主张作用于细胞壁和细胞质的抗生素联合应用,以达到杀菌并阻止其变成细菌L型。
结核菌l型将结核分枝杆菌分别接种于苏通液体培养基以及含最低抑菌浓度(MIC)的利福平、异烟肼、乙胺丁醇的苏通液体培养基内培养,L型自发形成或被诱导形成后过滤和传代培养获得L型纯培养物。观察L型纯培养物的形态与生长特性以及用结核分枝杆菌特异性基因片段的引物对L型进行菌种的PCR检测与鉴定。结果 结核分枝杆菌在非高渗透压培养基内培养3天后可自发形成L型,最低抑菌浓度的利福平、异烟肼、乙胺丁醇能够迅速诱导结核分枝杆菌大量形成L型。培养物经0.22μm孔径滤菌器过滤后传代培养可获得L型纯培养物,结核分枝杆菌特异性基因片段的PCR反应能够检测结核分枝杆菌L型并且对L型进行菌种的快速鉴定。结论 结核分枝杆菌能够自发形成和在抗结核药物的诱导下形成L型,从而导致病原学检查的漏诊或误诊以及影响治疗效果。采用非高渗培养法能够有效检出结核分枝杆菌L型,用结核分枝杆菌特异性基因片段的P(R反应能够对结核分枝杆菌稳定L型进行菌种快速鉴定。型细菌的耐药性与医院感染细菌变成L型后与其原菌株不同,故临床治疗用药时,不仅要考虑细菌的药敏,也要考虑L型的药敏。一般认为细菌变为L型后已经失去了细胞壁,而β-内酰胺抗生素(青霉素类抗生素)的作用主要是抑制肽聚糖的合成,所以对细菌L型不起作用,而对作用于核酸与蛋白质合成的药物如红霉素、氯霉素敏感。虽然临床分离出的细菌L型有不同程度的细胞壁缺陷,且常不稳定,但从许多病例分离出的细菌L型对作用于细胞壁的先锋霉素仍显敏感。先锋霉素虽也属β-内酰胺类抗生素,但它对β-内酰胺酶的作用稳定,而且先锋霉素也能作用于微生物的细胞膜,故临床选用先锋霉素大多有效。