胰腺癌细胞系

研究外源性PTEN对乏胰腺癌细胞系系ASPC-1细胞周期、血管内皮生长因子（VEGF）和表皮生长因子受体（EGFR）蛋白表达及细胞增殖能力的影响。方法将质粒pEAK8和pEAK8-PTEN分别转染ASPC-1细胞，获得ASPC-1-pEAK8（A-pE）细胞和ASPC-1-pEAK8-FFEN（A-pE-P）细胞，给予乏氧（1％O2）处理，并应用RT-PCR、Western印迹杂交、流式细胞术、成克隆分析及观察裸鼠移植瘤生长等方法进行检测。结果A-pE-P细胞PTEN mRNA及其蛋白表达明显高于ASPC-1细胞和A-pE细胞。与ASPC-1细胞相比，常氧时，A-pE-P细胞VEGF蛋白表达量下降了23．4％，EGFR蛋白表达量无明显变化，细胞克隆形成率降低了28．0％（F=4．283，P〈0．05），荷瘤裸鼠5周时，A-pE-P细胞组和ASPc-1细胞组瘤结节体积比较，差异有统计学意义（t=4．834，P〈0．01），A-pE-P细胞组的抑瘤率为42．4％。乏氧时，A-pE-P细胞VEGF蛋白表达量下降了31．4％，EGFR蛋白表达量降低了25．0％，细胞克隆形成率降低了33．2％（F=9．152，P〈0．01）。A-pE-P细胞较ASPC-1细胞G2／M期阻滞明显，乏氧培养8h时可引起细胞大量凋亡。结论外源性PTEN使ASPC-1细胞阻滞在G2／M期，增强乏氧诱导细胞的凋亡，抑制乏氧诱导VEGF、EGFR表达的增加，抑制肿瘤细胞的增殖。

　　为了探讨10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)对胰腺癌细胞质(ASPC-1)血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达、胰腺癌细胞系周期和增殖的影响，研究者将质粒pEAK8-PTEN和pEAK8分别转染指数生长期的胰腺癌细胞株(ASPC-1)，挑选阳性细胞克隆，扩增培养，用RT-PCR、Western印迹、流式细胞术、生长速率等方法分别检测PTEN对ASPC-1细胞VEGF蛋白、细胞周期及增殖能力的影响。结果ASPC-1细胞转染后，PTEN mRNA表达量是转染前的3倍，ASPC-1、ASPC-1-pEAK8、ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞PTEN蛋白表达量分别为13.2、12.6和21.6，VEGF蛋白表达量分别为17.2、16.5和13.1，转染后较转染前降低。细胞周期显示，ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞较ASPC-1、ASPC-1-pEAK8细胞G2/M、S期细胞增多，Gl期细胞减少，并出现少量凋亡细胞。ASPC-1-pEAK8-PTEN细胞生长曲线平缓，生长速度较另两种细胞明显降低。可见 PTEN可使ASPC-1细胞VEGF蛋白表达下降，细胞阻滞在G2/M期，抑制胰腺癌细胞系细胞增殖。