裸鼠体内肝转移模型建立的主要方法有盲肠壁种植法和脾脏切除脾脏种植法。
结肠癌未转移的治疗本实验采用目前较为公认的脾脏切除脾脏种植法,该法运用单细胞悬液注入脾脏,再由脾脏经血流进入肝脏,由于脾脏本身是一个免疫器官,癌细胞必须逃脱淋巴细胞、巨噬细胞等的攻击才能到达肝脏形成转移[6,7],因此采用这一方法造模,能很大程度上接近临床病人结肠癌肝转移的过程。本研究成功地建立人结肠癌细胞株裸鼠肝转移模型,肝转移率达100%,病理组织学显示,裸鼠肝转移癌灶呈人结肠癌低分化腺癌表现。CK20具有严格的上皮组织特异性,在癌细胞发生、生化、衰变、
肿瘤转移、结肠癌未转移的治疗体外培养等改变下均呈阳性表达[11],故许多学者将CK20 mRNA用于人大肠癌、
胃癌、
膀胱癌患者循环血中肿瘤细胞的标志物[12-14]。本实验建立的裸鼠肝转移模型,人结肠癌细胞在裸鼠肝转移过程中并不改变原有生物学特性,即裸鼠肝转移模型循环血中CK20 mRNA表达阳性,表明CK20 mRNA表达可作为检测肝转移模型成功的指标之一目前大肠癌的治疗仍以外科手术为首选方法,通过手术切除肿瘤病灶,达到根治目的,但对于微小的转移灶则无能为力。中医认为,结肠癌是由机体正气不足、湿毒瘀滞凝结而致病,术后可致气虚血瘀。中医通过调整机体,平衡阴阳,提高机体免疫功能,清除微小的转移灶,抑制肿瘤的转移和复发。复方参七汤是由参
三七、
人参、
黄芪、
当归、
陈皮、
木香、川草乌、半枝莲、
半边莲、
甘草、谷
麦芽等组成。治以健脾益气、清热祛湿、活血化瘀。目前的药理学研究表明,其中的大多数药物具有明确的抗肿瘤及其转移作用。参三七主要化学成分三七皂有抗肿瘤活性[8],与人参同用可止血散瘀、补气养血,活血消积。黄芪提取物具有调节免疫活性,促进外周血单核细胞对肿瘤细胞的吞噬和产生细胞因子的作用[9];制川乌、川草乌具有祛风除湿,温经止痛功效及抗肿瘤作用[10]。半枝莲、半边莲具有清热解毒、散瘀止血、定痛功效。以上各种药物的抗肿瘤作用都可能是复方参七汤药理作用的物质基础。本实验结果中尽管实验组裸鼠癌重、转移数目、病理改变、循环血中CK20 mRNA含量等指标均低于对照组,但裸鼠模型肝转移率为100%也表明,结肠癌未转移的治疗复方参七汤虽有增强机体抵抗力、抑制肿瘤生长的作用,但并不能完全抑制肿瘤的复发和转移,必须配合其它方法,才能彻底抑制肿瘤的复发和转移。中医中药治疗作为结肠癌综合治疗的一部分,通过平衡阴阳,提高机体免疫功能、杀灭肿瘤细胞等方法,对防治肿瘤的转移和复发有十分重要的意义。本实验采用的复方参七汤系经验方,符合中医中药的传统习惯,当然本实验仅以中药复方参七汤来研究大肠癌的复发和转移,可能有一定的局限性。手术根治、化疗、放疗和中医药等综合治疗,应是进一步提高结肠癌患者生存率的理想途径[15]。